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SDS-PAGE 凝胶试剂盒(推荐)
 
 
  • 产品名称:SDS-PAGE 凝胶试剂盒(推荐)
  • 产品型号:WB-0201
  • 产品产地:中国大陆
  • 采购热度:3249
  • 发布时间:2015/7/29 15:16:22
  • 简介内容:本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的大部分试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性PAGE凝胶。
详细内容/Content

SDS-PAGE 凝胶试剂盒(推荐)

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒   规格:可制40-60块凝胶  编号:WB-0201

产品简介: 本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的大部分试剂,
用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制
SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性PAGE凝胶。
包装清单 

2xSDS蛋白上样缓冲液(赠品) 2ml
30%丙烯酰胺混合液 100ml
1.5mol/L Tris(pH8.8) 100ml
1.0mol/L Tris(pH6.8) 30ml
过硫酸铵 0.5g
10% SDS 5ml
TEMED 0.5ml
说明书 一份

保存条件:为了保证产品质量,收到试剂盒之后请按如下方式保存:
(1)10% SDS和TEMED(避光)室温保存。10%SDS如有沉淀析出,37℃加热溶解即可。
(2)30%丙烯酰胺混合液、2×SDS蛋白上样缓冲液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8),4℃保存。
(3)过硫酸铵用5ml双蒸水溶解配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
10%过硫酸铵水溶液在室温状况下不稳定,4℃可以保存3-5天。
注意事项
10%过硫酸铵水溶液不太稳定,需注意存放条件和时间限制。如发现凝胶聚合不好,应更换配制的过硫酸铵溶液。
使用说明:根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
SDS-PAGE分离胶的浓度与*佳分离范围:
                                                         

SDS-PAGE分离胶浓度 *佳分离范围
6%胶 57-212kD
8%胶 36-94kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 10-43kD

               
                              配制6%的PAGE分离胶  

成分 所需各成分的体积(毫升) 
凝胶体积 5 10 15 20 25 30
蒸馏水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9
30%丙烯酰胺混合液  1.0 2.0 3.0 4.0 5 6.0
 1.5mol/L Tris(pH8.8)  1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5
10%SDS  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
10%过硫酸铵  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
TEMED  0.004  0.008 0.012  0.016  0.02  0.024

                                                      
                                配制8%的PAGE分离胶 

成分 所需各成分的体积(毫升) 
凝胶体积 5 10 15 20 25 30
蒸馏水 2.3 4.6 6.9 9.3 11.5 13.9
30%丙烯酰胺混合液  1.3 2.7 4.0 5.3 6.7 8.0
 1.5mol/L Tris(pH8.8)  1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5
10%SDS  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
10%过硫酸铵  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
TEMED  0.003 0.006 0.009 0.012 0.015
0.016
 

                                                     

                   配制10%的PAGE分离胶           
成分 所需各成分的体积(毫升) 
凝胶体积 5 10 15 20 25 30
蒸馏水 1.9 4.0 5.9 7.9 9.9 11.9
30%丙烯酰胺混合液  1.7 3.3 5.0 6.7 8.3 10.0
 1.5mol/L Tris(pH8.8)  1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5
10%SDS  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
10%过硫酸铵  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
TEMED  0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012

                   配制12%的PAGE分离胶           
成分 所需各成分的体积(毫升) 
凝胶体积 5 10 15 20 25 30
蒸馏水 1.6 3.3 4.9 6.6 8.2 9.9
30%丙烯酰胺混合液  2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0
 1.5mol/L Tris(pH8.8)  1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5
10%SDS  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
10%过硫酸铵  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
TEMED  0.002 0.004 0.006 0.008 0.01 0.012

                   配制15%的PAGE分离胶           
成分 所需各成分的体积(毫升) 
凝胶体积 5 10 15 20 25 30
蒸馏水 1.1 2.3 3.4 4.6 5.7 6.9
30%丙烯酰胺混合液  2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0
 1.5mol/L Tris(pH8.8)  1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5
10%SDS  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
10%过硫酸铵  0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
TEMED  0.002 0.004 0.006 0.008 0.001 0.012

3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)
                  配制不同体积的浓缩胶    
       
成分 所需各成分的体积(毫升) 
凝胶体积 2 3 4 5 6 8
蒸馏水凝胶体积 1.4 2.1 2.7 3.4 4.1 5.5
30%丙烯酰胺混合液  0.33 0.5 0.67 0.83 1.0 1.3
1.0mol/L Tris(pH6.8) 0.25 0.38 0.5 0.63 0.75 1.0
10%SDS 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08
10%过硫酸铵  0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006
0.008
 

注意事项: 10%过硫酸铵的水溶液不稳定,每次取用后应立即放回冰箱,
尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的10%过硫酸铵,
更换新配制的10%过硫酸铵。
另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,
可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。
操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
未聚合的丙烯酰胺有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
 
 


                                              

      

                                                      

                           







                                                                                                                                                                                    


 




 

更新时间:2024/3/26 8:52:59

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